Interleukin-2 (IL-2) - Stimulation und Kryopreservation kaniner Lymphozyten von gesunden und an Mammatumoren erkrankten Hunden zur adoptiven Tumorimmuntherapie beim Hund

Die Erzeugung lymphokin aktivierter Killerzellen (LAK) und deren Kryo-konservierung zur adoptiven Tumorimmuntherapie ist ein möglicher Ansatz zur Therapie von schwer oder nicht zugänglichen Tumoren und Metastasen. Die dazu benötigten Natürlichen Killerzellen wurden mittels einer Dichtegradientenzentri-fugation mit einem 58,5 %igen Percoll®-Gradienten aus dem Blut gesunder und an Mammatumoren erkrankter Hunde angereichert und anschließend in vitro mit humanem Interleukin 2 (rhIL-2) oder kaninem Interleukin 2 (rcIL-2, direkt von transfizierten BHK 21-Zellen während Koinkubation mit kaninen Lymphozyten sezerniert) stimuliert und anschließend auf ihre zytotoxische Aktivität (MTT-Test) hin geprüft. Zusätzlich wurde eine FACS-Analyse der Oberflächenmarker CD4, CD5, CD8 und CD21 durchgeführt. Weiterhin wurden mit rcIL-2-stimulierte Zellen mit einem programmierbaren Einfrierautomaten tiefgefroren und über mindestens drei Tage bei 196 °C gelagert. Anschließend wurden die Zellen aufgetaut und erneut eine zytotoxische Analyse durchgeführt. Dabei wurden folgende relevanten Ergebnisse ermittelt: